头孢曲松钠细菌内毒素检查方案设计
摘要
目的：研究头孢曲松钠细菌内毒素检查并检验头孢曲松钠中的细菌内毒素是否超标。方法：对设计原理、内毒素限值的确定、供试品稀释倍数和浓度范围的计算、鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及供试品有效浓度的确定等几个方面进行了研究。用凝胶法通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测内毒素含量。结果及结论：通过本次毕业设计，证实了细菌内毒素检查法适用于头孢曲松钠中细菌内毒素含量的检查，该方法在实际检测中能够有效控制产品质量。
关键词：内毒素 凝胶法 头孢曲松钠
头孢曲松钠细菌内毒素检查方案设计
一、前言
细菌内毒素检查法又称鲎试剂法，是利用鲎试剂与细菌内毒素发生凝集反应，来检查药品中细菌内毒素含量是否符合规定的一种快速、灵敏、经济、重现性好等优点的在国内外得到了日益广泛的应用的方法，而且已作为许多药品的标准分析方法。
细菌内毒素检查法系用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应即内毒素在二价阳离子的参与下，作用于鲎血凝集酶系统而发生的一系列酶联反应，最后形成凝胶，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定。
鲎试剂灵敏度复核试验项的目的不仅是考查鲎试剂和细菌内毒素工作标准品的效价是否准确，也是考查检验人员操作方法是否正确和实验条件是否符合规定。
因此要求每个实验室在将一批新的鲎试剂用于干扰试验或供试品细菌内毒素检查前应进行鲎试剂灵敏度复核试验。
供试品干扰试验项用于建立新品种细菌内毒素检查方法以及供试品的配方和工艺有变化，鲎试剂来源不同或供试品阳性对照结果呈阴性时确定供试品是否存在抑制或增强作用。所以检查一种药品内毒素是否超标时要对鲎试剂做灵敏度复核和对药品进行干扰验证。（阴性对照、阳性对照和供试品阳性对照必须同时进行，否则试验结果无效）
二、设计思路
利用鲎试剂与细菌内毒素发生凝集反应，考查鲎试剂和细菌内毒素工作标准品的效价是否准确和考查检验人员操作方法是否正确和实验条件是否符合规定，兼考查药品是否对鲎试剂有干扰。
（一）内毒素限值的确定
药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定：
L=K / M
式中 L 为供试品的细菌内毒素限值，一般以EU /ml、EU / mg 或EU / U （活性单位）表示；
K 为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU / ( kg · h ）表示，注射剂K = 5EU/(kg•h ) ，放射性药品注射剂K=2.5EU / （kg· h ) ，鞘内用注射剂K = 0.2EU / （kg· h ) ；
M 为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml / ( kg · h ）、mg / ( kg · h ）或U / ( kg · h ）表示，人均体重按60kg 计算，人体表面积按1.62m2 计算。注射时间若不足1 小时，按1 小时计算。供试品每平方米体表面积剂量乘以0.027 即可转换为每千克体重剂量（M）。
按人用剂量计算限值时，如遇特殊情况，可根据生产和临床用药实际情况做必要调整，但需说明理由。
目 录
内容摘要 1
一、前言 2
二、设计思路 2
（一）内毒素限值的确定 2
（二)最大有效稀释倍数（MVD ）的确定 3
（三）仪器与灭菌 3
三、解决方案 3
（一）灵敏度复核 3
（二）干扰实验 5
（三）凝胶限度实验 8
四、结论 9
参考文献 10
致谢 11
参考文献
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典.2015年版二部。北京：中国医药科技出版社2015.
［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典.2015年版四部。北京：中国医药科技出版社2015.
http://www.bysj360.com/html/6104.html http://www.bylw520.net/html/6039.html
